试剂和样本配置

在实验中，试剂样本孔、样本对照孔、空白孔和空白对照孔的具体体积如下：试剂样本孔设置为40µL，样本对照孔为40µL，空白孔为60µL，而空白对照孔的体积同样为40µL。样本配置使用尊龙凯时的黄嘌呤氧化酶工作液和稀释剂，反应体系中的工作试剂体积为16µL，确保混匀后在37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）孵育30分钟，最后在450nm处测定各孔的吸光值A。

数据计算方法

计算ΔA的方式为：样本的ΔA样本 = A样本 - A样本对照，ΔA空白 = A空白 - A空白对照。需注意，空白孔和空白对照孔建议仅设置2-3个；对于不同背景颜色的样本，则必须设定一个对照孔以去除样本本身的背景色。我们提供了包括推导过程的计算公式与简化公式，二者完全相等。最终的计算建议采用加粗的简洁计算公式。

抑制百分比的计算

抑制百分比的计算公式为：(ΔA空白 - ΔA样本) ÷ ΔA空白 × 100%。在进行测定时，建议样本的抑制百分比应保持在10-90%之间。如抑制百分比低于10%或高于90%，通常需调整加样量并重新进行测定。若抑制百分比偏高，应使用尊龙凯时的样品稀释剂进行适当稀释；如偏低，则需准备浓度较高的待测样本。

SOD酶活性单位

在上述黄嘌呤氧化酶偶联反应体系中，当抑制百分比为50%时，反应体系中的SOD酶活力被定义为一个酶活力单位(U/mL)。

SOD酶活性计算

血清（浆）SOD活力计算为：SOD活性(U/mL) = [抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) × V反总] ÷ V样 × n = 112 × 抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) × n。

对于组织和细胞的SOD活力计算，可分为三种方法：
a. 按样本蛋白浓度计算：SOD活性(U/mg prot) = [抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) × V反总] ÷ (V样 × Cpr) × n = 112 × 抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) ÷ Cpr；
b. 按样本鲜重计算：SOD活性(U/g 鲜重) = [抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) × V反总] ÷ (W × V样 ÷ V样总) × n = 112 × 抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) ÷ W；
c. 按细胞数量计算：SOD活性(U/10^4 cells) = [抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) × V反总] ÷ (500 × V样 ÷ V样总) × n = 00224 × 抑制百分比 ÷ (1 - 抑制百分比) × n。

其中，V反总为反应体系总的体积（0.224 mL），W为样本质量（g），V样为加入反应体系中的样本体积（0.02 mL），V样总为加入1×Lysis Buffer的体积（1mL），n为样本稀释倍数，Cpr为样本的蛋白质浓度（mg/mL），500为细胞总数（500万）。

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