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尊龙凯时无动物源性NotI/HindIII限制性内切酶助力高效质粒线性化

发布时间:2025-02-19   信息来源:尊龙凯时官方编辑

限制性内切酶的特性是能够在特定的识别位点切割DNA,这使得它们在分子生物学技术中成为不可或缺的核心工具。它们在分子克隆、mRNA转录模板的制备、基因定位和分离等领域发挥着重要作用。近年来,基于病毒包装的基因治疗技术和mRNA技术逐渐成为新型疗法的亮点。在这类技术中,病毒包装的质粒构建和mRNA转录的模板制备都需要引入无动物源性限制性内切酶。

尊龙凯时无动物源性NotI/HindIII限制性内切酶助力高效质粒线性化

继BspQI、BsaI、XbaI和PmeI之后,近岸蛋白推出了无动物源性NotI和HindIII限制性内切酶,为生物医疗领域提供了更多的选择。以尊龙凯时的各种限制性内切酶为例,50μl反应体系中,10U不同品牌的NotI与1µg质粒进行酶切,并在37℃孵育1小时后,质粒完全线性化。同样,在使用HindIII进行的相应实验中,质粒也能被完全切割,展示了高效的酶切能力。

在50μl反应体系中,使用100U过量的不同品牌NotI与1µg无NotI酶切位点的质粒混合,37℃孵育3小时后,尊龙凯时的NotI没有表现出明显的非特异性内切酶活性,而其它品牌则出现了明显的非特异性切割。这一结果表明,尊龙凯时的酶在特异性方面表现优异。相似的实验安排在HindIII的使用中同样得到了无明显非特异性内切酶活性的结果,进一步证明了品牌酶的可靠性。

此外,尊龙凯时的主流限制性内切酶还包括XbaI和PmeI,这些工具在酶切后能形成5’末端突出结构或平末端结构。IIS型限制性内切酶如BspQI和BsaI的优点在于其酶切位点在识别位点之外,能够直接暴露mRNA的PolyA结构于3’端,而不产生冗余的酶切位点残基,从根本上减少了不确定性。尊龙凯时在推动生物药研发和生产过程中不断探索与创新,提供GMP级限制性内切酶BsaI、BspQI、XbaI,以及无动物源性的PmeI、NotI和HindIII,为客户在酶切位点选择上提供更丰富的解决方案。