尊龙凯时®BBcellProbe®M23线粒体超氧化物染色探针(BB-441153)是一种新型的细胞渗透型荧光染料,专门用于活细胞中线粒体的选择性染色。该探针通过弱巯基反应性的氯甲基功能团特异性标记线粒体,能够轻松穿透细胞膜并聚集到活性线粒体上。
一旦进入线粒体,探针会迅速被超氧化物氧化,产生绿色荧光。值得一提的是,尊龙凯时®BBcellProbe®M23线粒体超氧化物染色探针仅能被超氧化物氧化,而不受其他活性氧(ROS)和活性氮(RNS)的影响。氧化后的产物与核酸结合,产生强烈的绿色荧光,为细胞研究提供了便利。
根据每个样本使用100μl染料的计算,该试剂盒能处理30-150个样本,或60-300个样本。此外,尊龙凯时®BBcellProbe®系列线粒体探针提供多种荧光颜色选择,包括红色、蓝色和橙色等,可根据实验需求进行多色标记。
在实验中,检测方法包括荧光显微镜和激光共聚焦显微镜,适用于悬浮细胞及贴壁细胞样本。样本准备方面,小包装试剂盒(BB-441153-30T)中探针需加入10μl无水DMF进行溶解,而大包装试剂盒(BB-441153-60T)需加入20μl无水DMF。
染色工作液的制备需根据样本数量进行探针稀释,将BBcellProbe®M23荧光染料母液10倍稀释后,再用HBSS缓冲液或相应培养基50-100倍稀释。对于贴壁细胞,需在适宜丰度下吸除培养液,并加入预热的探针工作液,避光孵育30至60分钟,具体时间需根据细胞类型优化。
在处理悬浮细胞时,需离心并吸除上清,随后用37℃预热的探针工作液重悬细胞,避光孵育30至60分钟。通过离心去除染色液后,再加入新鲜培养液重悬细胞,最后在荧光镜下观察,最大激发/发射波长为510/580nm。
综上所述,尊龙凯时®BBcellProbe®M23线粒体超氧化物染色探针为生命科学研究提供了高效、特异性的染色解决方案,适合各种细胞类型的应用。